Динамика Т-клеточной сенсибилизации при интраназальной и внутримышечной иммунизации двухкомпонентной векторной вакциной для профилактики коронавирусной инфекции на основе Аd26 и Аd5

• Зуев Евгений Васильевич
• Маркова Оксана Анатольевна
• Хамитов Равиль Авгатович

Резюме

Введение. Мукозальный путь иммунизации много лет остается в сфере внимания исследователей и вакцинопрофилактика COVID-19 не стала исключением. Один из объективных параметров оценки иммунологической эффективности - сенсибилизация Т-клеток в крови переболевших COVID-19 или получивших вакцинопрофилактику здоровых добровольцев. Оценка Т-клеточного иммунитета к SARS-CoV-2 важна не только для стратификации рисков и определения потенциально защищенных групп населения с иммунитетом, приобретенным вследствие перенесенной инфекции, но и для оценки иммуногенности и потенциальной эффективности разрабатываемых вакцин. Представлены результаты промежуточного анализа данных, полученных в рамках рандомизированного двойного слепого многоцентрового клинического исследования III фазы двухкомпонентной вакцины для профилактики COVID-19 с интраназальным (ИН) и внутримышечным (ВМ) путем введения.

Цель - оценить динамику Т-клеточного ответа к различным пептидам SARS-CoV-2 на фоне ИН и ВМ иммунизации двухкомпонентной векторной вакциной для профилактики развития COVID-19.

Материал и методы. В общей сложности 137 здоровых добровольцев с исходным уровнем анти-RBD-IgG-антител ≤ 100 BAU/мл были иммунизированы двухкомпонентной векторной вакциной (на основе Ad26 и Ad5) с ИН или ВМ путем введения в день 1 и день 21. Оценку иммуногенности проводили на основании изучения Т-клеточного ответа с использованием технологии IGRA-ELISPOT на 21-й и 42-й день после введения компонента I.

Результаты. Доля пациентов с сенсибилизацией Т-клеток к SARS-CoV-2 достоверно выросла на фоне ИН (с исходного уровня 33,9 % до 55,93 % на 42-й день) и ВМ (с исходного уровня 30,51 % до 61,02 % на 42-й день) иммунизации, она была сопоставима между группами на всех визитах. Получены данные о статистически значимом росте количества Т-клеток, специфичных к белку шипа (S) SARS-CoV-2 (суммарно CD8⁺ и CD4⁺) на фоне отсутствия сенсибилизации данных клеток к белкам N, M, ORF3a и ORF7a.

Заключение. Показан иммуногенный потенциал двухкомпонентной векторной вакцины (на основе Ad26 и Ad5) с ИН или ВМ путем введения с клональной активацией Т-клеток к белку шипа (S) SARS-CoV-2.

Ключевые слова: ELISPOT; SARS-CoV-2; COVID-19; Т-лимфоциты; антитела; вакцина; иммунитет

Введение

Пандемия новой коронавирусной инфекции СОVID-19 стала глобальным вызовом для системы здравоохранения страны, ответом на который стала массовая иммунизация эффективными вакцинами [1]. Коллективом ФГБУ "НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи" Минздрава России в 2020 г. была разработана инновационная векторная вакцина Гам-КОВИД-Вак для профилактики коронавирусной инфекции, вызываемой SARS-CoV-2 [2-7].

Важное направление в разработке вакцин - создание препаратов, воздействующих на слизистые оболочки организма (мукозальные вакцины). Поскольку входными воротами для возбудителя COVID-19 являются слизистые оболочки дыхательных путей, индукция мукозального иммунитета представляется обоснованной. При этом, по данным литературы, применение подобного типа вакцин приводит к индукции в том числе системного иммунного ответа, менее травматично и требует меньшего вовлечения медицинского персонала [8-12].

Эпидемиологические исследования показали, что наличие антител к SARS-CoV-2 не всегда обеспечивает полную защиту от инфекции [13]. Было установлено, что уровень защиты от повторного инфицирования после перенесенной инфекции SARS-CoV-2 достигает 85 % [14]. Антитела к нуклеопротеину SARS-CoV-2 и белку шипа (S-белку) вырабатываются в > 70 % случаев симптоматической инфекции [15]. У бессимптомно инфицированных лиц сообщалось о генерации Т-клеток, специфичных к SARS-CoV-2, без сероконверсии [16]. Компания "ГЕНЕРИУМ" разработала набор ELISPOT (Interferon-Gamma Release Assay - Enzyme Linked Immunosorbent Spot analysis; тест на секрецию гамма-интерферона - иммуноферментный анализ пятен) для определения сенсибилизированных к SARS-CoV-2 Т-клеток в крови (ТиграТест^® SARS-CoV-2). В настоящий момент набор зарегистрирован в качестве диагностического теста in vitro [17, 18].

Цель исследования - оценить динамику Т-клеточного ответа к различным пептидам SARS-CoV-2 на фоне интраназальной (ИН) и внутримышечной (ВМ) иммунизации двухкомпонентной векторной вакциной для профилактики развития COVID-19.

Материал и методы

Дизайн клинического исследования. Отбор биообразцов проводили в рамках рандомизированного двойного слепого многоцентрового клинического исследования III фазы, проводимого с февраля 2022 г. по октябрь 2023 г. с целью оценки иммуногенности ИН и ВМ форм комбинированной векторной вакцины против COVID-19. Исследование включало скрининг добровольцев, иммунизацию компонентом I (день 1) и компонентом II (день 21) исследуемых препаратов и период наблюдения (до 42 дней). Протокол исследования одобрен Минздравом России (РКИ № 869 от 20.12.2021) и независимыми локальными этическими комитетами клинических центров. Исследование проведено в соответствии с требованиями Надлежащей клинической практики и Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации пересмотра 2013 г. Добровольцы были включены в исследование на базе 9 медицинских учреждений Российской Федерации. Все добровольцы предоставили подписанное информированное согласие перед включением в исследование.

Критерии отбора добровольцев. Критерии включения: возраст 18-60 лет; уровень исходных анти-RBD-IgG-антител к SARS-CoV-2 ≤ 100 BAU/мл; отсутствие острого инфекционного или неинфекционного заболевания и обострения хронического заболевания за 14 дней до иммунизации.

Критерии исключения: любая вакцинация в течение 30 дней до включения с ограничением вакцинации против SARS-CoV-2 в течение 6 мес до включения в исследование; COVID-19 в анамнезе в течение 6 мес до включения; положительный ПЦР-тест или IgM на SARS-CoV-2 на скрининге; применение стероидных препаратов (кроме контрацептивов), иммуноглобулинов и/или других компонентов крови за 30 дней до рандомизации; затруднение носового дыхания; регулярное применение антиконгестантов; использование иммунодепрессантов, завершившееся менее чем за 3 мес до рандомизации; наличие в анамнезе аллергических заболеваний любого генеза, аутоиммунных заболеваний у добровольцев и у их родственников 1-2-й степени родства; сопутствующие заболевания, влияющие на результаты исследования.

Исследуемые препараты. Вакцина для профилактики COVID-19 с ИН путем введения одобрена к применению на территории Российской Федерации (регистрационное удостоверение ЛП-008297) с названием Салнавак. Она представляет собой формат ИН-введения вакцины Гам-КОВИД-Вак и состоит из двух компонентов: рекомбинантных вирусных частиц на основе аденовирусов человека серотипа 26 (компонент I) и 5 (компонент II), несущих ген S-белка SARS-CoV-2. Полная доза обеих вакцин составляет 10¹¹ (0,5 мл) вирусных частиц на дозу для каждого рекомбинантного аденовируса. Плацебо состоит из буферной композиции, равной объему вакцины. Исследуемые препараты и плацебо вводили ВМ или ИН в соответствии со схемой рандомизации.

Рандомизация и маскировка. Все добровольцы были распределены с использованием интерактивной системы методом блоковой рандомизации в соотношении 1 : 1 в 2 группы: группа 1 получала Салнавак путем ИН введения и плацебо путем ВМ инъекции; группа 2 получала Гам-Ковид-Вак ВМ и плацебо ИН. Препараты и плацебо внешне неотличимы по упаковке, этикетке и содержимому. Распределение добровольцев по группам исследования было замаскировано для исследователей, добровольцев и всего исследовательского персонала (двойной слепой формат).

Процедуры. Для всех участников был проведен отбор биообразцов для оценки специфического T-клеточного ответа в день 1 (до введения компонента I), день 21 (до введения компонента II) и день 42. Клинико-лабораторные данные были собраны с использованием электронной платформы EDC.

Лабораторные исследования. Для оценки Т-клеточного иммунитета был применен коммерческий набор ТиграТест^® SARS-CoV-2, использующий метод для выявления in vitro в крови Т-лимфоцитов, специфически отвечающих на антигены SARS-COV-2 (на белки S, N, M, ORF3a и ORF7a), на основе технологии IGRA-ELISPOT (Interferon-Gamma Release Assay - Enzyme Linked Spot analysis, анализ высвобождения ИФН-γ - иммуноферментный анализ пятен). Данный метод предназначен для качественной оценки T-клеточного иммунного ответа и позволяет подсчитать в условиях in vitro число активированных эффекторных Т-лимфоцитов, выделяющих цитокин ИФН-γ, в ответ на стимуляцию антигенами SARS-CoV-2.

Сбор, хранение и транспортировку биообразцов для проведения лабораторных тестов выполняли согласно нормативным требованиям и рекомендациям центральной лаборатории. Анализ ELISPOT выполняли в соответствии с инструкцией производителя набора ТиграТест^® SARS-CoV-2 (АО "ГЕНЕРИУМ", Россия).

Мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) каждого добровольца инкубировали в течение 16-24 ч с пептидными антигенами (концентрация каждого пептида в пуле составляла 2 мкг/мл). Индивидуальный тест для каждого донора состоял из 4 лунок: отрицательный контроль, без стимуляции МКПК; стимуляция пептидами S-белка (панель № 1); стимуляция пептидами белков N, M, ORF3a и ORF7a (панель № 2); положительный контроль (стимуляция всех жизнеспособных и функционально активных Т-клеток с помощью антитела к CD3, клон ОКТ-3).

В каждую лунку вносили 350 000 МКПК. Пятна (споты) подсчитывали как визуально под стереомикроскопом, так и с помощью специализированного ELISPOT-ридера AID Classic ELR08 (AID GmbH, Германия). Величину Т-клеточного ответа выражали как количество подсчитанных пятен в лунке за вычетом количества пятен в отрицательном контроле (без стимуляции антигенами). Критерием приемлемости теста были результаты положительного и отрицательного контроля. В положительном контроле должно было быть ≥ 100 пятен, в отрицательном контроле - ≤ 14 пятен. Наличие > 14 пятен могло свидетельствовать об остром воспалительном процессе или о случайном загрязнении образца клеток эндотоксинами.

Статистический анализ выполнен с помощью языка программирования статистических расчетов R версии 4.1.3 [19]. В анализ включены данные добровольцев без значимых отклонений от протокола исследования. При сравнении исходных характеристик добровольцев, данных Т-клеточного ответа (на логарифмированных данных) использовался t-критерий Стьюдента, для сравнений групп добровольцев по полу и доле добровольцев с положительным Т-клеточным ответом - критерий χ².

Сравнение внутри групп между визитами исследования в динамике проводили с помощью дисперсионного анализа с повторными измерениями (Repeated Measures Analysis Of Variance, RM-ANOVA), для качественного параметра - доли добровольцев с положительным T-клеточным ответом - с помощью критерия Мадански. В случае выявления статистически значимой динамики проводили попарные post-hoc сравнения между визитами по количественным параметрам - с помощью t-критерия Стьюдента для зависимых выборок, по качественным параметрам - с помощью критерия МакНемара. Полученные в результате post-hoc сравнений уровни p корректировались поправкой Холма для множественных сравнений. При нормальном типе распределения исходные характеристики представлены как Mean ± SD, где Mean - среднее значение, SD - стандартное отклонение; при распределении отличающимся от нормального как медиана и межквартильный размах (Me [Q1;Q3]). Параметры Т-клеточного ответа представлены как GeomMean ± GeomSD, где GeomMean - среднее геометрическое значение, Geom SD - стандартное отклонение среднего геометрического. В качестве критического уровня значимости (p) принималось значение менее 0,05.

Результаты

В исследование было скринировано 703 добровольца, 138 (19,63 %) из них соответствовали всем критериям включения/невключения и были рандомизированы в 2 группы вакцинопрофилактики. Полная анализируемая совокупность (Full Analysis Set, FAS) составила 137 добровольцев, из них 19 были исключены из популяции "по протоколу" (Per Protocol, PP), их данные не учитывали при анализе иммуногенности. Добровольцы в сравниваемых группах не отличались между собой по исходным характеристикам (табл. 1). Также не было различий по доле пациентов с положительным качественным тестом на выявление сенсибилизированных Т-лимфоцитов и по их количеству (p > 0,05).

В течение 42 дней наблюдения доля добровольцев с положительным T-клеточным ответом по двум панелям тест-системы суммарно (сенсибилизация либо к S-белку, либо к белкам N, M, ORF3a и ORF7a SARS-CoV-2) при ИН и ВМ вакцинации выросла в 1,55 (p = 0,006) и 2 (p < 0,001) раза соответственно. При этом в группе реципиентов препарата Салнавак ко дню 21 доля таких добровольцев выросла в 1,65 раза (p = 0,014) и осталась без изменений между днями 21 и 42 (p = 0,56). В группе ВМ иммунизации основной рост доли добровольцев с наличием Т-клеточного ответа наблюдался между 1 и 21 днями наблюдения и составил 1,89 раза (p = 0,003). Между днями 21 и 42 достоверная динамика не выявлена (p = 0,59) (табл. 2).

В группе реципиентов Салнавак в ходе исследования отмечалась значимая положительная динамика числа сенсибилизированных T-лимфоцитов к S-белку SARS-CoV-2. Геометрическое среднее значение (геометрическое стандартное отклонение) их числа до иммунизации (день 1) составило 6,03 ± 3,60. Ко дню 21 исследования число сенсибилизированных T-лимфоцитов панели № 1 в группе реципиентов Салнавак выросло в 1,99 раза от исходного уровня (p = 0,002) - до 11,97 ± 3,09 - и далее до дня 42 оставалось стабильным (p = 0,09); число сенсибилизированных T-лимфоцитов панели № 1 на день 42 составило 9,57 ± 3,38. С момента начала исследования (день 1) до дня 42 число сенсибилизированных T-лимфоцитов панели № 1 в группе реципиентов Салнавак увеличилось в 1,59 раза (p = 0,019).

В группе реципиентов Гам-КОВИД-Вак в ходе исследования также отмечалась статистически достоверный рост числа T-лимфоцитов, сенсибилизированных к S-белку SARS-CoV-2 (панель № 1 тест-системы; p < 0,001). Среднее геометрическое значение их числа в день 1 составило 5,99 ± 2,79 и ко дню 21 увеличилось до 11,94 ± 2,94 - в 1,99 раза от исходного (p < 0,001). Ко дню 42 статистически значимые изменения числа сенсибилизированных T-лимфоцитов панели № 1 относительно дня 21 (p = 0,069): число на день 42 составило 14,27 ± 3,10. В целом за время, прошедшее от начала исследования, число сенсибилизированных T-лимфоцитов панели № 1 в группе реципиентов Гам-КОВИД-Вак увеличилось в 2,38 раза (p < 0,001). Все значения количества Т-лимфоцитов указаны от 350 000 МКПК в соответствии с инструкцией по применению тест-системы (см. рисунок).

Сравнение групп по данным соотношения средних геометрических числа Т-лимфоцитов, сенсибилизированных к S-белку SARS-CoV-2 (панель № 1) показало отсутствие достоверных различий между группами на каждом из трех визитов. Отношение средних геометрических числа Т-лимфоцитов в панели № 1 составило 1,01 [95 % доверительный интервал (ДИ) 0,62; 1,64] в день 1 - до вакцинации (p = 0,98), 1,00 [95 % ДИ 0,66; 1,53] на день 21- после введения компонента I (p = 0,99) и 0,67 [95 % ДИ 0,43; 1,53] на день 42 (p = 0,08).

Динамика числа Т-лимфоцитов, сенсибилизированных к белкам N, M, ORF3a и ORF7a SARS-CoV-2 (панель № 2 тест-системы) отсутствовала в сравниваемых группах (p > 0,05) (табл. 3).

Обсуждение

В течение короткого времени после появления SARS-CoV-2 в мире был разработан и внедрен в широкую практику ряд вакцин на разных платформах, а чуть позже в зону интересов исследователей попал мукозальный способ проведения иммунопрофилактики данного заболевания. В большинстве вакцин белок шипа (S) SARS-CoV-2 является целевым иммуногеном по причине связывания домена RBD субъединицы S1 белка S с ангиотензин-превращающим ферментом 2 (ACE2) клетки-хозяина [20, 21]. Соответственно иммунный ответ к S-белку возбудителя может предотвратить проникновение вируса в клетки-хозяева [22]. Опубликованы данные, подтверждающие связь появления Т-клеток, специфичных к SARSCoV-2, с уменьшением тяжести COVID-19 [23, 24].

В настоящее время иммунный ответ Т-клеток на SARS-CoV-2 изучен в ряде научных исследований с использованием передовых, но сложных и немасштабируемых методов проточной цитометрии или оценки пролиферации Т-клеток. В то же время были разработаны воспроизводимые, стандартизованные и высокопроизводительные серологические методы анализа.

В ответ на вирусную инфекцию макрофаги и дендритные клетки, презентирующие пептиды возбудителя, мигрируют в лимфатические узлы, где они избирательно активируют хелперные (CD4⁺) и цитотоксические (CD8⁺) Т-клетки. Специфическая активация пептидами вируса приводит к пролиферации отвечающих на стимуляцию Т-клеток и продукции ими внутриклеточных цитотоксических белков перфорина и гранзима В, а также к секреции противовирусных Th1-цитокинов [25].

Активированные цитотоксические CD8⁺-Т-клетки мигрируют в места инфекции, где элиминируют пораженные вирусом клетки хозяина, предотвращая дальнейшую экспансию вируса. Th2-цитокины приводят к дополнительной активации В-клеток после их взаимодействия с антигенами вируса и усиливают продукцию вирус-специфичных антител [14].

Использование гуморальных факторов для оценки напряженности иммунного ответа не является исчерпывающим. Так, по опубликованным данным, около 10-30 % пациентов, перенесших коронавирусную инфекцию, не имеют детектируемого уровня антител к возбудителю [15]. При этом титры вирус-нейтрализующих антител могут быстро снижаться с течением времени [16, 26]. Таким образом, с целью более валидной оценки иммунного ответа к возбудителю COVID-19 требуется изучение сенсибилизации Т-клеток к белкам SARS-CoV-2, в том числе по причине более раннего его развития.

Так, опубликованы данные о появлении активированных Т-клеток уже через 1 нед после первых симптомов инфекции [27]. Мукозальная иммунизация рассматривается в качестве метода, позволяющего прервать передачу инфекции за счет активации барьерной защиты на слизистых оболочках на фоне индукции системного гуморального и клеточного ответа.

ИН-вакцины, разработанные Bharat Biotech и CanSino Biologics, одобрены к применению в Индии и Китае соответственно [28]. В России к ИН-применению одобрены вакцины Гам-КОВИД-Вак и Салнавак.

Проведено сравнительное изучение динамики Т-клеточной сенсибилизации в ответ на ИН- и ВМ-вакцинацию, по итогам которого получили данные о достоверной активации Т-клеточного ответа к S-белку SARS-CoV-2. Уровень Т-клеточного ответа был сопоставимым при ИН- и ВМ-иммунизации векторной вакциной для профилактики COVID-19. Сопоставимой была и доля пациентов с положительным тестом на определение сенсибилизированных Т-лимфоцитов. Отсутствие повышения количества Т-лимфоцитов, сенсибилизированных к белкам N, M, ORF3a и ORF7a SARS-CoV-2, подтверждает фармакодинамические особенности исследуемых вакцин, антигенный состав которых нацелен на формирование иммунного ответа к S-белку возбудителя.

Заключение

По итогам проведенного исследования был показан иммуногенный потенциал двухкомпонентной векторной вакцины (на основе Ad26 и Ad5) с ИН- или ВМ-путем введения с клональной активацией Т-клеток к S-белку SARS-CoV-2. При этом уровень Т-клеточного ответа был сопоставим в сравниваемых группах. Отсутствие активации Т-лимфоцитов к белкам N, M, ORF3a и ORF7a возбудителя подтверждает специфическую фармакодинамическую активность вакцины.

Благодарности. Авторы выражают благодарность Таисии Викторовне Григорьевой за сотрудничество и помощь в сборе материала, Илье Александровичу Короткевичу за проведение статистического анализа, сотрудникам лаборатории ООО "Экзактэ Лабс" за анализ биоматериала.

Литература

1. Спасенников Б.А. COVID-19: уроки вакцинации. Бюллетень Национального научно-исследовательского института общественного здоровья имени Н.А. Семашко. 2021; 3: 116-25. DOI: https://doi.org/10.25742/NRIPH.2021.03.017

2. Гудима Г.О., Хаитов Р.М., Кудлай Д.А., Хаитов М.Р. Молекулярно-иммунологические аспекты диагностики, профилактики и лечения коронавирусной инфекции. Иммунология. 2021; 42 (3): 198-210. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-3-198-210

3. Logunov D.Y., Dolzhikova I.V., Zubkova O.V., Tukhvatulin A.I., Shcheblyakov D.V., Dzharullaeva A.S., Grousova D.M., Erokhova A.S., Kovyrshina A.V., Botikov A.G., Izhaeva F.M., Popova O., Ozharovskaya T.A., Esmagambetov I.B., Favorskaya I.A., Zrelkin D.I., Voronina D.V., Shcherbinin D.N., Semikhin A.S., Simakova Y.V., Tokarskaya E.A., Lubenets N.L., Egorova D.A., Shmarov M.M., Nikitenko N.A., Morozova L.F., Smolyarchuk E.A., Kryukov E.V., Babira V.F., Borisevich S.V., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. Safety and immunogenicity of an rAd26 and rAd5 vector-based heterologous prime-boost COVID-19 vaccine in two formulations: two open, non-randomised phase 1/2 studies from Russia. Lancet. 2020; 396 (10255): 887-97. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)31866-3

4. Морозов А.Н., Яхин И.Р., Стратонова Н.В., Куцкир М.В., Потеряев Д.А., Хамитов Р.А. Опыт масштабирования и интенсификации промышленного производства векторной аденовирусной вакцины Гам-КОВИД-Вак в лимитирующих условиях пандемии. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2022; 22 (4): 382-91. DOI: https://doi.org/10.30895/2221-996X-2022-22-4-382-391

5. Андреев И.В., Нечай К.О., Андреев А.И., Зубарева А.П., Есаулова Д.Р., Аленова А.М., Николаева И.А., Чернявская О.П., Ломоносов К.С., Шульженко А.Е., Курбачева О.М., Латышева Е.А., Шартанова Н.В., Назарова Е.В., Романова Л.В., Черченко Н.Г., Смирнов В.В., Аверков О.В., Мартынов А.И., Вечорко В.И., Гудима Г.О., Кудлай Д.А., Хаитов М.Р., Хаитов Р.М. Поствакцинальный и постинфекционный гуморальный иммунный ответ на инфекцию SARS-CoV-2. Иммунология. 2022; 43 (1): 18-32. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-1-18-32

6. Андреев А.И., Андреев И.В., Нечай К.О., Есаулова Д.Р., Баклакова О.С., Вечорко В.И., Шиловский И.П., Кофиади И.А., Гудима Г.О., Мартынов А.И., Смирнов В.В., Кудлай Д.А., Хаитов М.Р. Взаимосвязь между возрастом и напряженностью поствакцинального гуморального иммунного ответа у лиц, ранее переболевших COVID-19. Иммунология. 2022; 43 (5): 583-92. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-5-583-592

7. Нечай К.О., Андреев А.И., Андреев И.В., Есаулова Д.Р., Баклакова О.С., Шадыжева М.Б., Романова Л.В., Гегечкори В.И., Черченко Н.Г., Вечорко В.И., Кофиади И.А., Гудима Г.О., Мартынов А.И., Смирнов В.В., Кудлай Д.А., Хаитов М.Р. Динамическая оценка напряженности иммунного ответа на SARS-CoV-2-инфекцию и иммунизацию против COVID-19 вакциной "Спутник V". Иммунология. 2023; 44 (2): 157-66. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2023-44-2-157-166

8. Almeida A.J., Alpar H.O. Nasal delivery of vaccines. J. Drug Target. 1996; 3 (6): 455-67. DOI: https://doi.org/10.3109/10611869609015965

9. Boyaka P.N., Tafaro A., Fischer R., Leppla S.H., Fujihashi K., McGhee J.R. Effective mucosal immunity to anthrax: neutralizing antibodies and Th cell responses following nasal immunization with protective antigen. J. Immunol. 2003; 170 (11): 5636-43. DOI: https://doi.org/10.4049/jimmunol.170.11.5636

10. Neutra M.R., Kozlowski P.A. Mucosal vaccines: the promise and the challenge. Nature Rev. Immunol. 2006; 6: 149-58. DOI: https://doi.org/10.1038/nri1777

11. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Пащенков М.В. Эпителиальные клетки дыхательных путей как равноправные участники врожденного иммунитета и потенциальные мишени для иммунотропных средств. Иммунология. 2020; 41 (2): 107-13. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2020-41-2-107-113

12. Пинегин Б.В., Пащенков М.В., Пинегин В.Б., Хаитов Р.М. Эпителиальные клетки слизистых оболочек и новые подходы к иммунопрофилактике и иммунотерапии инфекционных заболеваний. Иммунология. 2020; 41 (6): 486-500. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2020-41-6-486-500

13. Kiyono H., Fukuyama S. NALT-versus Peyer’s-patch-mediated mucosal immunity. Nat. Rev. Immunol. 2004; 4: 699-710. DOI: https://doi.org/10.1038/nri1439

14. Channappanavar R., Zhao J., Perlman S. T cell-mediated immune response to respiratory coronaviruses. Immunol. Res. 2014; 59 (1-3): 118-28. DOI: https://doi.org/10.1007/s12026-014-8534-z

15. Tan W., Lu Y., Zhang J., Wang J., Dan Y., Tan Zh., He X., Qian Ch., Sun Q., Hu Q., Liu H., Ye S., Xiang X., Zhou Y., Zhang W., Guo Y., Wang X, He W., Wan X., Sun F., Wei Q., Chen C., Pan G., Xia J., Mao Q., Chen Y., Deng G. Viral kinetics and antibody responses in patients with COVID-19. MedRxiv. 2020. URL: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.03.24.20042382v1 (date of access 13 June 2024)

16. Ibarrondo F.J., Fulcher J.A., Goodman-Meza D., Elliott J., Hofmann C., Hausner M.A., Ferbas K.G., Tobin N.H., Aldrovandi G.M., Yang O.O. Rapid decay of anti-SARS-CoV-2 antibodies in persons with mild COVID-19. N. Engl. J. Med. 2020; 383 (11): 1085-7. DOI: https://doi.org/10.1056/NEJMc2025179

17. Потеряев Д.А., Аббасова С.Г., Игнатьева П.Е., Стрижакова О.М., Колесник С.В., Хамитов Р.А. Оценка Т-клеточного иммунитета к SARS-CoV-2 у переболевших и вакцинированных против COVID-19 лиц с помощью ELISPOT набора ТиграТест^® SARS-CoV-2. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2021; 21 (3): 178-92. DOI: https://doi.org/10.30895/2221-996X-2021-21-3-178-192

18. Лягоскин И.В., Каргополова П.Е., Объедков Д.А., Егорова И.Ю., Шукуров Р.Р. Внутрилабораторная валидация "ТиграТест^® SARS-CoV-2" - теста на высвобождение интерферона гамма in vitro для определения в крови Т-лимфоцитов, специфически отвечающих на антигены вируса SARS-CоV-2. Инфекция и иммунитет. 2022; 12 (4): 701-12. DOI: https://doi.org/10.15789/2220-7619-ILV-1855

19. R Core Team. R: A Language and Environment for Statistical Computing. R Foundation for Statistical Computing. 2020. URL: https://www.R-project.org (date of access 13 June 2024)

20. Jiang Y., Wu Q., Song P., You C. The Variation of SARS-CoV-2 and Advanced Research on Current Vaccines. Front Med (Lausanne). 2022; 8: 806641. DOI: https://doi.org/10.3389/fmed.2021.806641

21. Heinz F.X., Stiasny K. Distinguishing features of current COVID-19 vaccines: knowns and unknowns of antigen presentation and modes of action. NPJ Vaccines. 2021; 6: 104. DOI: https://doi.org/10.1038/s41541-021-00369-6

22. Lombardi A., Bozzi G., Ungaro R., Villa S., Castelli V., Mangioni D., Muscatello A., Gori A., Bandera A. Mini Review Immunological Consequences of Immunization with COVID-19 mRNA Vaccines: Preliminary Results. Front. Immunol. 2021; 12: 657711. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.657711

23. Altmann D.M., Boyton R.J. SARS-CoV-2 T cell immunity: specificity, function, durability, and role in protection. Science Immunology. 2020; 5 (49): eabd6160. DOI: http://doi.org/10.1126/sciimmunol.abd6160

24. Swadling L., Maini M.K. T cells in COVID-19 - united in diversity. Nat. Immunol. 2020; 21 (11): 1307-8. DOI: http://doi.org/10.1038/s41590-020-0798-y

25. Пащенков М.В., Хаитов М.Р. Иммунный ответ против эпидемических коронавирусов. Иммунология. 2020; 41 (1): 5-18. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2020-41-1-5-18

26. Астахова Е.А., Бязрова М.Г., Миляев С.М., Сухова М.М., Михайлов А.А., Морозов А.А., Прилипов А.Г., Филатов А.В. Анализ методом проточной цитометрии антител против шиповидного белка SARS-CoV-2 в сыворотке вакцинированных добровольцев. Иммунология. 2022; 43 (4): 447-57. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-4-447-457

27. Todryk S.M., Pathan A.A., Keating S., Porter D.W., Berthoud T., Thompson F., Klenerman P., Hill A.V.S. The relationship between human effector and memory T cells measured by ex vivo and cultured ELISPOT following recent and distal priming. Immunology. 2009; 128: 83-91. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1365-2567.2009.03073.x

28. Singh G.R., Kaur K., Matariya R., Singh B., Sood R., Singh J. Intranasal (IN) COVID-19 vaccines - a breakthrough. Rocz. Panstw. Zakl. Hig. 2023; 74 (1): 15-8. https://doi.org/10.32394/rpzh.2023.0251

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)