Количественная характеристика показателей экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников

• Богуш Татьяна Анатольевна
• Осипова Анна Александровна
• Ли Алексей
• Богуш Елена Александровна
• Гришанина Анна Николаевна
• Равчеева Анна Борисовна
• Косоруков Вячеслав Станиславович

Резюме

Введение. Расширение спектра молекулярных прогностических и предиктивных маркеров опухолей - это современный тренд, направленный на повышение эффективности лекарственной терапии опухолей разного генеза, включая рак яичников, результаты лечения которого остаются неудовлетворительными. В этой связи значительным потенциалом обладает белок цитоскелета TUBB3, который экспрессируется в эпителиальных опухолях. В фундаментальных исследованиях доказано, что гиперэкспрессия TUBB3 повышает метастатический потенциал опухолевых клеток и индуцирует резистентность к широкому кругу лекарств. Однако в трансляционных исследованиях при полуколичественном анализе экспрессии TUBB3 оценки вклада этого белка в агрессивность рака яичников и эффективность химиотерапии неоднозначны.

Цель исследования - количественная оценка показателей экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников и определение корреляции выявленных параметров с клиническими характеристиками новообразования.

Материал и методы. Исследованы хирургические образцы ткани рака яичников (n = 51). Использованы первичные моноклональные антитела к TUBB3 (клон EP1569Y, Abcam, Великобритания) и вторичные антитела, конъюгированные с красителем DyLight650 (ab98510, Abcam, Великобритания). Уровень флуоресценции измеряли на проточном цитометре Navios (Beckman Coulter, США). Количество окрашенных клеток определяли в программе FlowJo 10.0.8 (США) методом Колмогорова-Смирнова. Рассчитаны три показателя экспрессии TUBB3: уровень (%), интенсивность (усл. ед.), индекс (усл. ед.). Статистический анализ нормальности распределения показателей экспрессии TUBB3, сравнения выборок и оценки корреляции проведены в программе GraphPad Prism 6.0 (GraphPad Software, США).

Результаты. В исследованной выборке опухолей TUBB3 выявлен в 100 % случаев при значительных различиях количественных показателей (до 10 раз) у разных пациенток, что совпадает с клиническими данными о гетерогенности ответа пациенток на лекарственную терапию и сроков общей выживаемости. Выявлены слабая ассоциативная связь между уровнем и интенсивностью экспрессии TUBB3 и отсутствие различий в показателях в зависимости от стадии рака яичника и степени дифференцировки опухоли. При сравнительном исследовании у одних и тех же пациенток первичного и метастатического рака яичников (опухолевые клетки из асцитической жидкости при канцероматозе брюшины) стабильность молекулярного фенотипа продемонстрирована менее чем в 40 % случаев. У остальных пациенток уровень экспрессии TUBB3 в опухолевых клетках в половине случаев увеличился, в половине - уменьшился.

Заключение. Количественный иммунофлуоресцентный анализ экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников выявил этот белок в 100 % случаев при медиане уровня экспрессии TUBB3 55 % и выраженной гетерогенности показателей у разных пациенток. Не выявлено различий по уровню, интенсивности и индексу экспрессии TUBB3 в зависимости от стадии заболевания и степени дифференцировки опухоли. Разнонаправленные изменения уровня экспрессии TUBB3 отмечены в клетках метастатического рака яичников по сравнению с первичной опухолью тех же пациенток. Сформированная база данных позволит провести точный анализ предиктивной значимости экспрессии TUBB3 в опухоли и определить количественные показатели, которые вносят вклад в лекарственную резистентность.

Ключевые слова: рак яичников; TUBB3; опухоль-ассоциированный маркер

Введение

В настоящее время одним из трендов, направленных на повышение эффективности лекарственной терапии опухолей различного генеза, является расширение спектра молекулярных прогностических и предиктивных маркеров. В полной мере это относится к раку яичников, результаты лечения которого нельзя признать удовлетворительными.

В этой связи значительный интерес представляет изоформа белка цитоскелета тубулина - TUBB3, который экспрессируется в эпителиальных опухолях, клетках Сертоли, нейронах и лишь в незначительных количествах в эндотелии, что позволяет рассматривать его как опухоль-ассоциированный белок [1, 2]. В этом заключается уникальность данного белка как потенциальной мишени противоопухолевых препаратов и их модификаторов, диагностического и прогностического маркера эпителиальных новообразований, включая рак яичников.

Вклад TUBB3 в биологию опухолевой клетки изучен во многих фундаментальных исследованиях на культурах клеток. В частности, гиперэкспрессия TUBB3 в опухолевых клетках снижает их связь с базальной мембраной, позволяет выходить за ее пределы, увеличивая метастатический потенциал опухолевых клеток [3-6] и их пролиферативную активность [5, 7, 8]. Более того, гиперэкспрессия TUBB3 повышает жизнеспособность клеток в условиях глюкозного голодания и гипоксии [9-11], а также индуцирует резистентность к анойкису [6, 12, 13], что повышает агрессивность эпителиальных опухолей.

Не менее важна и связь TUBB3 с резистентностью к противоопухолевым препаратам. Хрестоматийными стали данные о зависимости эффективности препаратов, воздействующих на микротрубочки цитоскелета - винкаалкалоидов и таксанов, от уровня экспрессии в клетках TUBB3 [14-20], при этом корреляцию между уровнем экспрессии TUBB3 и резистентностью опухоли к таксанам впервые выявили в культуре клеток рака яичников [21]. Кроме того, гиперэкспрессия TUBB3 индуцирует резистентность к ДНК-повреждающим противоопухолевым препаратам - цисплатину и доксорубицину [14, 20, 22], а также к низкомолекулярным ингибиторам тирозинкиназ [8, 12]. Важно отметить, что, согласно международным клиническим рекомендациям, именно препараты платины и таксаны являются стандартом первой линии химиотерапии рака яичников [23, 24].

Результаты трансляционных исследований по анализу клинической значимости TUBB3 при оценке агрессивности течения рака яичников и эффективности химиотерапии с включением препаратов платины и таксанов малочисленны и неоднозначны. В одних работах продемонстрировано снижение продолжительности безрецидивного течения рака яичников и общей выживаемости пациенток с высокой экспрессией TUBB3 в опухоли, в других - нет [25-31]. Но самая важная неопределенность этих исследований заключается в том, что методически они не унифицированы и все оценки были получены полуколичественным иммуногистохимическим методом.

Тем не менее, в целом можно утверждать, что вектор биологической направленности TUBB3 и в клинических исследованиях неблагоприятный, а точная количественная оценка показателей экспрессии этого маркера позволит выявить группу пациенток с раком яичников с худшим прогнозом заболевания и скорректировать тактику лечения.

Более того, TUBB3 является точкой приложения препаратов, повреждающих цитоскелет, а потому может рассматриваться как мишень нового класса противоопухолевых лекарств, в частности так называемых миграстатиков, направленных на снижение метастатического потенциала опухолевых клеток [32-34]. Очевидно, что разработка таких препаратов и оценка их эффективности также потребуют точных оценок параметров экспрессии TUBB3 в опухоли.

Учитывая все вышесказанное, мы провели количественную оценку показателей экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников иммунофлуоресцентным методом, ассоциированным с проточной цитометрией, и определили корреляцию выявленных параметров с клиническими характеристиками новообразования.

Материал и методы

Образцы ткани. В работе исследованы образцы ткани рака яичников (n = 51), полученные в ходе хирургических операций в ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России. Образцы опухолей фиксировали в 4 % растворе формальдегида (ПанЭко, Россия) рН = 7,4. Спустя минимум 2 сут фиксации каждый образец подвергали многоступенчатой процедуре подготовки одноклеточной суспензии, пригодной для работы на проточном цитометре [35, 36].

Для приготовления одноклеточных суспензий образцы опухолей измельчали острыми ножницами и инкубировали в растворе Версена (ПанЭко, Россия) в течение 30 мин при 37 °С. Затем ткань гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе 5-кратным осторожным движением пестика и фильтровали через фильтр с размерами пор 40 мкм. Суспензию клеток центрифугировали в течение 5 мин на скорости 3000 об/мин, ресуспендировали в 4 % растворе формальдегида рН = 7,4 и хранили в холодильнике.

Лабораторные исследования. Иммунофлуоресцентное окрашивание проводили с использованием 100 мкл суспензии с концентрацией 200 тыс. кл/мл. Клетки инкубировали с первичными антителами в течение 1 ч при комнатной температуре. После отмывки клеток 20-кратным объемом 0,5 % раствора бычьего сывороточного альбумина (БСА) (ПанЭко, Россия) к клеткам добавляли вторичные антитела и инкубировали в течение 1,5 ч при 4 °C. Для удаления из анализа разрушенных клеток, эритроцитов и конгломератов суспензию клеток в течение 15 мин инкубировали с красителем ДНК Hoechst 33258 (Sigma, США) в концентрации 1,2 мкг/мл, после чего 2 раза проводили отмывку 20-кратным объемом 0,5 % раствора БСА.

В работе использованы первичные кроличьи моноклональные антитела, специфичные к TUBB3 (клон EP1569Y, Abcam, Великобритания), в конечном разведении 1 : 400. В качестве вторичных использованы антикроличьи антитела, конъюгированные с флуоресцентным красителем DyLight650 (ab98510, Abcam, Великобритания), в конечном разведении 1 : 25.

Для перманентного контроля активности антител при проведении каждого иммунофлуоресцентного анализа использовали монослойную культуру клеток аденокарциномы протоков молочной железы человека линии MCF-7 [Американская коллекция типовых культур (ATCC), США].

Уровень флуоресценции измеряли на проточном цитометре Navios (Beckman Coulter, США). Сигнал флуоресценции красителей DyLight650 и Hoechst 33258 регистрировали в каналах FL-6 и FL-9 соответственно. Анализ данных проводили с помощью программного обеспечения FlowJo 10.0.8 (США).

Рассчитывали 3 показателя экспрессии TUBB3: уровень экспрессии маркера (%) - количество клеток, экспрессирующих данный белок; интенсивность экспрессии (усл. ед.) - среднее количество маркера, экспрессирующегося в клетке (отношение среднего геометрического специфической флуоресценции в опытном образце к контролю - инкубация только с вторичными антителами); индекс экспрессии (усл. ед.) - произведение уровня и интенсивности экспрессии маркера, деленное на 100.

Статистический анализ. Статистический анализ данных проведен в программе GraphPad Prism 6.0 (GraphPad Software, США). Для определения нормальности распределения показателей экспрессии TUBB3 применяли критерий Шапиро-Уилка, для сравнения выборок - U-критерий Манна-Уитни, для оценки корреляции - критерий Спирмена. Статистически значимыми признавали различия при р < 0,05.

Результаты

Характеристика включенных в исследование опухолей по гистотипу, стадии заболевания и степени злокачественности представлена в табл. 1.

Видно, что среди представленной выборки образцов ткани рака яичников преобладает серозная аденокарцинома - 92 % из всех исследованных образцов. I или II стадия заболевания выявлена в 15,7 % случаев, III - в 70,6 %, IV стадия - в 13,7 %. Суммарно III и IV стадия заболевания диагностирована в 84,3 % случаев. По степени патоморфологической дифференцировки в группе преобладают низкодифференцированные (low-grade) опухоли - в 86,3 % случаев.

Результаты молекулярной диагностики рака яичников по количественным показателям экспрессии в опухоли белка цитоскелета TUBB3 представлены на рис. 1, статистические параметры показателей - в табл. 2.

Полученные результаты указывают на значительную гетерогенность показателей экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников. Так, при медиане уровня экспрессии маркера 55 % различие между максимальным и минимальным значением показателя достигло 6 раз (86 vs 14 %). Для интенсивности экспрессии TUBB3 медиана составила 2,7 усл. ед., при этом различие между максимальным и минимальным значением показателя практически достигло 5 раз (1,4 vs 6,6). Это отразилось и на интегральном показателе экспрессии TUBB3 - индексе: различие между максимальным и минимальным значениями достигло 10 раз. При этом, поскольку распределение показателей интенсивности и индекса экспрессии TUBB3 носит ненормальный характер (табл. 2), во всех последующих оценках мы ориентировались на значения медианы. Результаты оценки ассоциативной связи между уровнем и интенсивностью экспрессии TUBB3 представлены на рис. 2.

Коэффициент ранговой корреляции Спирмена составил 0,37 в ряду показателей уровня и интенсивности экспрессии TUBB3, что свидетельствует о слабой корреляции показателей между собой. Исходя из этого, оценка корреляции экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников с клинически значимыми характеристиками заболевания проведена по медиане как уровня, так и интенсивности экспрессии маркера (табл. 3).

При статистической оценке по U-критерию Манна-Уитни не выявлено различий в уровне, интенсивности и индексе экспрессии TUBB3 в зависимости от стадии рака яичника (I + II vs III + IV) и степени дифференцировки опухоли (low-grade vs high-grade).

В то же время сравнительный анализ выявил разнонаправленные различия между экспрессией TUBB3 в ткани первичной опухоли до проведения химиотерапии и в клетках метастатического рака, полученных у тех же пациенток из асцитической жидкости при прогрессировании заболевания и канцероматозе брюшины (рис. 3).

Полученные результаты показали, что в 6 из 11 пар (55 %) уровень экспрессии TUBB3 значимо, более чем на 10 %, изменился. В 3 из 11 пар (27 %) в клетках метастатического рака яичников уровень экспрессии TUBB3 увеличился, в таком же числе случаев снизился, а в остальных парах сравнения (46 %) экспрессия этого маркера в первичной и в метастатической опухоли была сходной.

Обсуждение

Как упоминалось выше, основанием для проведения настоящего исследования стали две группы фактов. С одной стороны, убедительные результаты исследований на культурах клеток разного генеза, в том числе рака яичников, о роли TUBB3 в реализации агрессивности, метастатического потенциала и резистентности опухолевых клеток к противоопухолевым препаратам [3-22]. С другой стороны, неоднозначность клинических данных о значимости этого опухолевого маркера в оценке прогноза агрессивности течения рака яичников и эффективности химиотерапии с включением препаратов платины и таксанов [25-31].

По нашему мнению, причиной такой дискордантности является использование в трансляционных исследованиях разнообразных, неунифицированных, полуколичественных методик, так как полученные с их помощью данные не пригодны для количественных оценок корреляции с клиническими характеристиками течения заболевания. Учитывая важность последней задачи, в данной работе проведен количественный иммунофлуоресцентный анализ экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников с использованием проточной цитометрии. Опухоли охарактеризованы по уровню и интенсивности, а также по интегральному показателю - индексу экспрессии маркера.

В исследованной выборке опухолей TUBB3 выявлен в 100 % случаев при значительных различиях количественных показателей (до 10 раз) у разных пациенток, что совпадает с клиническими данными о гетерогенности ответа пациенток на лекарственную терапию и сроков общей выживаемости.

Статистический анализ экспрессии TUBB3 в ткани рака яичников не выявил изменений величины медианы количественных показателей уровня, интенсивности и индекса экспрессии маркера в зависимости от стадии заболевания и степени дифференцировки опухоли. В то же время при сравнительном исследовании у одних и тех же пациенток первичного и метастатического рака яичников стабильность молекулярного фенотипа продемонстрирована менее чем в 40 % случаев. У остальных пациенток при диссеминации процесса по брюшине уровень экспрессии TUBB3 в опухолевых клетках, полученных из асцитической жидкости, изменился: в половине случаев увеличился, в половине - уменьшился. Иными словами, при прогрессировании заболевания метастатический потенциал опухоли по выраженности экспрессии TUBB3 может остаться на первоначальном уровне, уменьшиться или увеличиться. Последнее - важный с клинической точки зрения факт, который указывает на целесообразность при лечении метастатического рака яичников при диссеминации по брюшине "ухода" у ряда пациенток от препаратов первой линии химиотерапии даже в случае ее эффективности.

Причиной выявленных изменений молекулярного фенотипа опухолевых клеток может быть прежде всего переход от роста в плотной ткани (в сόлидной опухоли) к существованию в асцитической жидкости. С другой стороны, поскольку в асцитическую жидкость попадают опухолевые клетки из сόлидных узлов на брюшине, уровень экспрессии TUBB3 в этих клетках может отражать молекулярный фенотип сόлидных метастазов, который мог претерпеть изменения под влиянием проведенного лечения.

В целом полученные результаты делают возможным проведение в дальнейшем точного анализа предиктивной значимости экспрессии TUBB3 в опухоли и выявление количественных показателей, которые вносят вклад в лекарственную резистентность. При этом важно отметить уникальные для решения этой задачи особенности лекарственного лечения пациенток с раком яичников. Во-первых, строгая регламентация первой линии химиотерапии, которая включает препараты платины и таксанов [23-24]. Во-вторых, возможность количественной оценки эффективности этой терапии. Конкретно - рецидив заболевания в течение 6 мес - опухоль резистентна; после 12 мес - чувствительна; в период 6-12 мес - условно чувствительна. Создание базы этих клинических данных в настоящее время завершается.

И наконец выявление у половины пациенток в опухоли высокого уровня экспрессии TUBB3 - > 55 %, свидетельствует о том, что рак яичников можно отнести к заболеваниям, при которых новый вид противоопухолевой антиметастатической терапии миграстатиками [32-34] может быть эффективен.

Выводы

1. Количественный иммунофлуоресцентный анализ показателей экспрессии белка цитоскелета TUBB3 в ткани рака яичников выявил этот маркер во всех исследованных образцах опухоли при медиане уровня экспрессии TUBB3 55 % и выраженной гетерогенности показателей у разных пациенток.

2. Не выявлено различий в уровне, интенсивности и индексе экспрессии TUBB3 в зависимости от стадии заболевания и степени дифференцировки опухоли.

3. Выявлены разнонаправленные изменения уровня экспрессии TUBB3 в клетках метастатического рака, полученных из асцитической жидкости при канцероматозе брюшины, по сравнению с первичной опухолью тех же пациенток до проведения химиотерапии.

4. Сформированная база количественных показателей экспрессии TUBB3 делает возможным проведение в дальнейшем точного анализа предиктивной значимости экспрессии TUBB3 в опухоли и выявление количественных показателей, которые вносят вклад в лекарственную резистентность.

Литература

1. Мамичев И.А., Богуш Т.А., Богуш Е.А., Терентьева Н.С., Кирсанов В.Ю., Давыдов М.М. Белок микротрубочек βIII-тубулин: строение, экспрессия и функции в нормальных и опухолевых клетках. Антибиотики и химиотерапия. 2018; 63 (7-8): 79-90. DOI: https://doi.org/10.24411/0235-2990-2018-00039

2. Person F., Wilczak W., Hube-Magg C., Burdelski C., Möller-Koop C., Simon R., Noriega M., Sauter G., Steurer S., Burdak-Rothkamm S., Jacobsen F. Prevalence of βIII-tubulin (TUBB3) expression in human normal tissues and cancers. Tumour Biol. 2017; 39 (10): 1-11. DOI: https://doi.org/10.1177/1010428317712166

3. Panda D., Miller H.P., Banerjee A., Ludueña R.F., Wilson L. Microtubule dynamics in vitro are regulated by the tubulin isotype composition. Proc Natl Acad Sci USA. 1994; 91 (24): 11358-62. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.91.24.11358

4. Pamula M.C., Ti S.C., Kapoor T.M. The structured core of human β tubulin confers isotype-specific polymerization properties. J Cell Biol. 2016; 213 (4): 425-33. DOI: https://doi.org/10.1083/jcb.201603050

5. Fan Y., Fan X., Yan H., Liu Z., Wang X., Yuan Q., Xie J., Lu X., Yang Y. Long non-coding ROR promotes the progression of papillary thyroid carcinoma through regulation of the TESC/ALDH1A1/TUBB3/PTEN axis. Cell Death Dis. 2022; 13 (2): 157-67. DOI: https://doi.org/10.1038/s41419-021-04210-9

6. McCarroll J.A., Gan P.P., Erlich R.B., Liu M., Dwarte T., Sagnella S.S., Akerfeldt M.C., Yang L., Parker A.L., Chang M.H., Shum M.S., Byrne F.L., Kavallaris M. TUBB3/βIII-tubulin acts through the PTEN/AKT signaling axis to promote tumorigenesis and anoikis resistance in non-small cell lung cancer. Cancer Res. 2015; 75 (2): 415-25. DOI: https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-14-2740

7. Lebok P., Öztürk M., Heilenkötter U., Jaenicke F., Müller V., Paluchowski P., Geist S., Wilke C., Burandt E., Lebeau A., Wilczak W., Krech T., Simon R., Sauter G., Quaas A. High levels of class III β-tubulin expression are associated with aggressive tumor features in breast cancer. Oncol Lett. 2016; 11 (3): 1987-94. DOI: https://doi.org/10.3892/ol.2016.4206

8. Xie X., Laster K.V., Li J., Nie W., Yi Y.W., Liu K., Seong Y.S., Dong Z., Kim D.J. OSGIN1 is a novel TUBB3 regulator that promotes tumor progression and gefitinib resistance in non-small cell lung cancer. Cell Mol Life Sci. 2023; 80 (9): 272-90. DOI: https://doi.org/10.1007/s00018-023-04931-4

9. Raspaglio G., De Maria I., Filippetti F., Martinelli E., Zannoni G.F., Prislei S., Ferrandina G., Shahabi S., Scambia G., Ferlini C. HuR regulates beta-tubulin isotype expression in ovarian cancer. Cancer Res. 2010; 70 (14): 5891-900. DOI: https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-09-4656

10. De Donato M., Mariani M., Petrella L., Martinelli E., Zannoni G.F., Vellone V., Ferrandina G., Shahabi S., Scambia G., Ferlini C. Class III β-tubulin and the cytoskeletal gateway for drug resistance in ovarian cancer. J. Cell. Physiol. 2012; 227 (3): 1034-41. DOI: https://doi.org/10.1002/jcp.22813

11. Parker A.L., Turner N., McCarroll J.A., Kavallaris M. βIII-Tubulin alters glucose metabolism and stress response signaling to promote cell survival and proliferation in glucose-starved non-small cell lung cancer cells. Carcinogenesis. 2016; 37 (8): 787-98. DOI: https://doi.org/10.1093/carcin/bgw058

12. Huang J., Lan X., Wang T., Lu H., Cao M., Yan S., Cui Y., Jia D., Cai L., Xing Y. Targeting the IL-1β/EHD1/TUBB3 axis overcomes resistance to EGFR-TKI in NSCLC. Oncogene. 2020; 39 (8): 1739-55. DOI: https://doi.org/10.1038/s41388-019-1099-5

13. McCarroll J.A., Gan P.P., Liu M., Kavallaris M. betaIII-tubulin is a multifunctional protein involved in drug sensitivity and tumorigenesis in non-small cell lung cancer. Cancer Res. 2010; 70 (12): 4995-5003. DOI: https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-09-4487

14. Tamura D., Arao T., Nagai T., Kaneda H., Aomatsu K., Fujita Y., Matsumoto K., De Velasco M.A., Kato H., Hayashi H., Yoshida S., Kimura H., Maniwa Y., Nishio W., Sakai Y., Ohbayashi C., Kotani Y., Nishimura Y., Nishio K. Slug increases sensitivity to tubulin-binding agents via the downregulation of βIII and βIVa-tubulin in lung cancer cells. Cancer Med. 2013; 2 (2): 144-54. DOI: https://doi.org/10.1002/cam4.68

15. Zhuo Y., Guo Q. Down-regulated βIII-tubulin expression can reverse paclitaxel resistance in A549/taxol cells lines. Zhongguo Fei Ai Za Zhi. 2014; 17 (8): 581-7. DOI: https://doi.org/10.3779/j.issn.1009-3419.2014.08.01

16. Zhu S., Ni Y., Sun G., Wang Z., Chen J., Zhang X., Zhao J., Zhu X., Dai J., Liu Z., Liang J., Zhang H., Zhang Y., Shen P., Zeng H. Exosomal TUBB3 mRNA expression of metastatic castration-resistant prostate cancer patients: Association with patient outcome under abiraterone. Cancer Med. 2021; 10 (18): 6282-90. DOI: https://doi.org/10.1002/cam4.4168

17. Sekino Y., Han X., Kawaguchi T., Babasaki T., Goto K., Inoue S., Hayashi T., Teishima J., Shiota M., Yasui W., Matsubara A. TUBB3 reverses resistance to docetaxel and cabazitaxel in prostate cancer. Int. J. Mol. Sci. 2019; 20 (16): 3936-50. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms20163936

18. Sun X., Zhang Y., Xin S., Jin L., Cao Q., Wang H., Wang K., Liu X., Tang C., Li W., Li Z., Wen X., Yang G., Guo C., Liu Z., Ye L. NOTCH3 promotes docetaxel resistance of prostate cancer cells through regulating TUBB3 and MAPK signaling pathway. Cancer Sci. 2024; 115 (2): 412-26. DOI: https://doi.org/10.1111/cas.16040

19. Quan P.M., Binh V.N., Ngan V.T., Trung N.T., Anh N.Q. Molecular docking studies of vinca alkaloid derivatives on tubulin. Vietnam J. Chem. 2019; 57 (6): 702-6. DOI: https://doi.org/10.1002/vjch.201900087

20. Gan P.P., Pasquier E., Kavallaris M. Class III beta-tubulin mediates sensitivity to chemotherapeutic drugs in non small cell lung cancer. Cancer Res. 2007; 67 (19): 9356-63. DOI: https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-07-0509

21. Karki R., Mariani M., Andreoli M., He S., Scambia G., Shahabi S., Ferlini C. βIII-Tubulin: biomarker of taxane resistance or drug target? Expert Opin. Ther. Targets. 2013; 17 (4): 461-72. DOI: https://doi.org/10.1517/14728222.2013.766170

22. Pernar Kovač M., Tadić V., Kralj J., Duran G.E., Stefanelli A., Stupin Polančec D., Dabelić S., Bačić N., Tomicic M.T., Heffeter P., Sikic B.I., Brozovic A. Carboplatin-induced upregulation of pan β-tubulin and class III β-tubulin is implicated in acquired resistance and cross-resistance of ovarian cancer. Cell. Mol. Life Sci. 2023; 80 (10): 294-312. DOI: https://doi.org/10.1007/s00018-023-04943-0

23. Vanderpuye V.D., Clemenceau J.V., Temin S., Aziz Z., Burke W.M., Cevallos N.L., Chuang L.T., Colgan T.J., Del Carmen M.G., Fujiwara K., Kohn E.C., Gonzáles Nogales J.E., Konney T.O., Mukhopadhyay A., Paudel B.D., Tóth I., Wilailak S., Ghebre R.G. Assessment of adult women with ovarian masses and treatment of epithelial ovarian cancer: ASCO resource-stratified guideline. JCO Glob. Oncol. 2021; 7: 1032-66. DOI: https://doi.org/10.1200/GO.21.00085

24. Тюляндина А.С., Коломиец Л.А., Морхов К.Ю., Нечушкина В.М., Покатаев И.А., Румянцев А.А. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака яичников, первичного рака брюшины и рака маточных труб. Практические рекомендации RUSSCO, часть 1. Злокачественные опухоли. 2023; 13 (3s2): 201-15. DOI: https://doi.org/10.18027/2224-5057-2023-13-3s2-1-201-215

25. Su D., Smith S.M., Preti M., Schwartz P., Rutherford T.J., Menato G., Danese S., Ma S., Yu H., Katsaros D. Stathmin and tubulin expression and survival of ovarian cancer patients receiving platinum treatment with and without paclitaxel. Cancer. 2009; 115 (11): 2453-63. DOI: https://doi.org/10.1002/cncr.24282

26. Du J., Li B., Fang Y., Liu Y., Wang Y., Li J., Zhou W., Wang X. Overexpression of class III β-tubulin, Sox2, and nuclear survivin is predictive of taxane resistance in patients with stage III ovarian epithelial cancer. BMC Cancer. 2015; 15: 536-46. DOI: https://doi.org/10.1186/s12885-015-1553-x

27. Sève P., Dumontet C. Is class III beta-tubulin a predictive factor in patients receiving tubulin-binding agents? Lancet Oncol. 2008; 9 (2): 168-75. DOI: https://doi.org/10.1016/S1470-2045(08)70029-9

28. Zhao D., Zhang W., Li X.G., Wang X.B., Li M., Li Y.F., Tian H.M., Song P.P., Liu J., Chang Q.Y., Wu L.Y. The mRNA expression of BRCA1, ERCC1, TUBB3, PRR13 genes and their relationship with clinical chemosensitivity in primary epithelial ovarian cancer. Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2012; 34 (3): 196-200. DOI: https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2012.03.008

29. Martinelli E., Fattorossi A., Battaglia A., Petrillo M., Raspaglio G., Zannoni G.F., Fanelli M., Gallo D., Scambia G. Preoperative anti-class III β-tubulin antibodies as relevant clinical biomarkers in ovarian cancer. Transl. Oncol. 2018; 11 (2): 358-65. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tranon.2018.01.016

30. Herzog T.J., Spetzler D., Xiao N., Burnett K., Maney T., Voss A., Reddy S., Burger R., Krivak T., Powell M., Friedlander M., McGuire W. Impact of molecular profiling on overall survival of patients with advanced ovarian cancer. Oncotarget. 2016; 7 (15): 19840-9. DOI: https://doi.org/10.18632/oncotarget.7835

31. Ferrandina G., Zannoni G.F., Martinelli E., Paglia A., Gallotta V., Mozzetti S., Scambia G., Ferlini C. Class III beta-tubulin overexpression is a marker of poor clinical outcome in advanced ovarian cancer patients. Clin. Cancer Res. 2006; 12 (9): 2774-9. DOI: https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-05-2715

32. Rosel D., Fernandes M., Sanz-Moreno V., Brábek J. Migrastatics: redirecting R&D in solid cancer towards metastasis? Trends. Cancer. 2019; 5 (12): 755-6. DOI: https://doi.org/10.1016/j.trecan.2019.10.011

33. Solomon J., Raškova M., Rösel D., Brábek J., Gil-Henn H. Are we ready for migrastatics? Cells. 2021; 10 (8): 1845-52. DOI: https://doi.org/10.3390/cells10081845

34. Vasarri M., Barletta E., Degl’Innocenti D. Marine migrastatics: a comprehensive 2022 update. Mar Drugs. 2022; 20 (5): 273-92. DOI: https://doi.org/10.3390/md20050273

35. Богуш Т.А., Башарина А.А., Богуш Е.А., Гришанина А.Н., Сакаева Д.М., Кирсанов В.Ю., Давыдов М.М., Косоруков В.С. Иммунофлуоресцентный анализ de novo экспрессии виментина в ткани рака яичников: хирургические образцы vs парафиновые блоки. Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. 2020; 61 (6): 399-404. DOI: https://doi.org/10.3103/S0027131420060036

36. Bogush T.A., Basharina A.A., Eliseeva B.K., Kaliuzhny S.A., Bogush E.A., Kirsanov V.Y, Davydov M.M, Kosorukov V.S. A new approach to epithelial-mesenchymal transition diagnostics in epithelial tumors: double immunofluorescent staining and flow cytometry. Biotechniques. 2020; 69 (4): 257-63. DOI: https://doi.org/10.2144/btn-2020-0024

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)