Иммунология

В обзоре рассматриваются вопросы патогенеза туберкулеза (ТБ) у детей раннего возраста. Особое внимание уделяется развитию ТБ у детей этого возраста в доантибактериальную эру, поскольку заболевание развивалось естественным путем - без влияния вакцинации и химиотерапии.

Так, большое внимание уделено разбору трагедии, произошедшей в начале 1930 г. в немецком городе Любеке, когда 251 новорожденному ребенку в результате трагической ошибки вместо вакцины БЦЖ троекратно ввели вирулентный штамм микобактерий туберкулеза (МБТ) per os. В результате у них развился ТБ, погибли 77 (30,7 %) детей. Посмертно 72 из них было проведено патологоанатомическое исследование и бактериологический посев материала, который подтвердил наличие вирулентных МБТ, описана картина развития туберкулезного процесса до момента смерти, поскольку дети умирали в разные сроки после введения МБТ, последний умер на 313-й день.

Данные, полученные при вскрытии, до настоящего момента не были оценены и полностью не охарактеризованы. Большой вклад в оценку этих событий внесли P. Donald и соавт., которые исследовали документы, описывающие эти события. Важно отметить, что после этого выжившие дети в течение 12 лет, пока велось наблюдение за ними, не заболели ТБ. Из выживших детей 90 % имели положительные реакции на кожную туберкулиновую пробу, что могло быть реакцией как на введение вирулентных микобактерий, так и, вероятно, вакцинный штамм БЦЖ. Из-за низкой специфичности туберкулиновых проб не удалось определить это достоверно.

Только в настоящее время удалось получить кожные тесты на основе специфичных для МБТ белков ESAT6 и CFP10, которые позволяют дифференцировать эти состояния почти со 100 % специфичностью.

Также приведены данные российских ученых, полученные в период до появления противотуберкулезных препаратов.

В обзоре приводятся современные взгляды на развитие ТБ у детей, начиная с внутриутробного развития, момента рождения, основанные на анализе иммунных механизмов развития ТБ, что особенно важно учитывать при создании новых вакцин против ТБ у детей различных возрастных групп.

Введение. Накопление сенесцентных клеток с возрастом принято считать одной из причин дисфункции различных органов и тканей при старении организма. Иммунная система участвует в элиминации сенесцентных клеток, однако сама она также подвержена старению. Для определения сенесцентного статуса клеток принято оценивать активность фермента β-галактозидазы (SA-β-Gal), которая накапливается в стареющих клетках. Однако активность SA-β-Gal в популяции лимфоцитов доноров разного возраста изучена недостаточно. Таким образом, становится актуальным вопрос использования SA-β-Gal в качестве маркера сенесцентных лимфоцитов при изучении процессов старения иммунной системы.

Цель исследования - оценка активности SA-β-Gal в популяциях Т-лимфоцитов, различающихся по наличию поверхностных маркеров активации, периферической крови доноров разного возраста.

Материал и методы. В исследовании приняли участие 20 условно здоровых доноров в возрасте 21-32 и 50-61 года. Выделенные из периферической крови мононуклеарные клетки фенотипировали при помощи антител против поверхностных маркеров, фиксировали, инкубировали с субстратом для определения активности SA-β-Gal и анализировали методом проточной цитометрии.

Результаты. Обнаружено, что субпопуляции Т-лимфоцитов, положительные по маркерам активации CD25 и HLA-DR, обладают более высокой активностью SA-β-Gal. Популяция регуляторных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3⁺CD4⁺CD25^highCD127^low/- (CD4⁺-Treg) демонстрирует достоверно более низкую активность SA-β-Gal в сравнении с общим пулом CD4⁺-Т-клеток. При этом значимых различий в активности SA-β-Gal среди доноров двух возрастных групп не обнаружено, за исключением субпопуляций с фенотипом CD3⁺CD8⁺HLA-DR⁺ и CD3⁺CD8⁺HLA-DR⁺CD127^- (CD8⁺-Treg), где активность SA-β-Gal с возрастом была ниже.

Заключение. Нами было показано, что активированные эффекторные CD4⁺- и CD8⁺-Т-клетки обладают повышенной активностью SA-β-Gal, тогда как CD4⁺-Treg демонстрируют сниженную активность SA-β-Gal. Это, по-видимому, отражает метаболические особенности клеток данных популяций. При этом мы не выявили достоверного увеличения процентного содержания SA-β-Gal^high-клеток или увеличения ее активности с возрастом, что ограничивает использование данного метода для оценки возрастных изменений в иммунной системе. Тем не менее, активность SA-β-Gal может быть использована как дополнительный индикатор активации Т-лимфоцитов наряду с поверхностными маркерами активации у доноров исследованных возрастных групп.

Введение. Развитие долгосрочной иммунной памяти в отношении SARS-CoV-2 у населения является важной целью для создания надежного коллективного иммунитета.

Цель - изучить особенности формирования гибридного иммунитета в условиях предшествующей инфекции и последующей вакцинации.

Материал и методы. Обследованы 60 пациентов, перенесших COVID-19 и/или вакцинированных препаратом на основе пептидных антигенов SARS-CoV-2. Группу сравнения составили 20 практически здоровых доноров. Оценивалась динамика иммунологических показателей при формировании постинфекционного, поствакцинального и гибридного иммунитета к SARS-CoV-2.

Результаты. У переболевших COVID-19 в сравнении с практически здоровыми лицами отмечено снижение функциональных показателей клеток моноцитарного ряда; активация Т-лимфоцитов, снижение содержания В2-лимфоцитов при увеличении доли В1-лимфоцитов. В поствакцинальном периоде у неболевших COVID-19 выявлено снижение содержания HLA-DR⁺- и TLR9⁺-моноцитов, увеличение содержания Т-регуляторных клеток на фоне повышения экспрессии активационных маркеров Т- и В-лимфоцитов с изменением соотношения за счет фенотипа В1. В условиях гибридного иммунитета увеличено содержание Т-лимфоцитов памяти, усилена функциональная активность В-лимфоцитов с незначительным нарастанием содержания В1-лимфоцитов.

Заключение. Показаны преимущества гибридного иммунитета перед другими вариантами, заключающиеся в наименьших сдвигах ключевых иммунологических показателей врожденного и адаптивного иммунитета на фоне достоверного увеличения синтеза специфических антител к различным антигенным детерминантам вируса.

Введение. Согласно одной из аксиом иммунологии, многочисленные цитокины, хемокины и ростовые факторы функционируют в рамках единой цитокиновой сети, поэтому актуально их исследование не в изолированном виде, а в виде плеяд, т. е. взаимодействующих элементов.

Цель - оценка изменений взаимозависимых концентраций группы цитокинов ФНО-ИЛ-1-ИЛ-4-ИЛ-6-ИЛ-8-ИЛ-10-VEGF в сыворотке крови здоровых женщин и пациенток с лейомиомой матки (ЛМ).

Материал и методы. Проведено наблюдательное исследование "случай-контроль" с участием 109 женщин в возрасте от 23 лет до 61 года с ЛМ и 92 практически здоровых женщин аналогичного возраста без данной патологии. Всем женщинам проводили общеклинические, стандартные инструментальные и лабораторные обследования. Концентрации цитокинов в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-систем фирмы "Вектор-Бест" (Россия). Для обнаружения связи между исследуемыми показателями проводили корреляционный анализ путем вычисления коэффициента ранговой корреляции Спирмена с последующей графической визуализацией и анализом структуры корреляционных связей методом корреляционных графов с помощью биоинформационной программной платформы Cytoscape 3.10.2.

Результаты. Наличие миоматозных узлов в матке сопровождается значительным (в разы) повышением концентраций ФНО, ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8 в периферической крови на фоне снижения концентрации VEGF. Получены три варианта корреляционных плеяд: группа общих (неспецифических) корреляций и две группы ортогональных коррелограмм. Из них одна характерна только для группы сравнения, а вторая - специфична только для пациенток с ЛМ.

Заключение. Доброкачественный опухолевый процесс миометрия существенно влияет на характер функциональных связей в исследованном фрагменте общей цитокиновой сети, что наглядно иллюстрируется изменениями графических элементов в корреляционном графе с выделением двух альтернативных ортогональных групп корреляционных плеяд, выявляемых у пациенток с миоматозными узлами по отношению к группе сравнения.

Введение. Цитокины могут быть эффективными инструментами для иммунотерапии опухолей, однако при привычных путях введения - внутривенной инфузии и внутримышечных или подкожных инъекциях (при системном введении) - небольшая часть введенных цитокинов может достигать клеток-мишеней в органах респираторной системы.

Цель работы - продемонстрировать возможность профилактики метастазов рака молочной железы (РМЖ) с помощью цитокиновых препаратов и представить алгоритм ведения пациента.

Материал и методы. Использован ингаляционный способ введения фармакопейных цитокинов (фактор некроза опухолей - тимозин альфа-1 рекомбинантный - Рефнот; интерферон гамма человеческий рекомбинантный - Ингарон; интерферон альфа-2b - Реаферон; интерлейкин 2 - Ронколейкин) для профилактики развития метастазов в легких у пациентки после мастэктомии по поводу РМЖ, находящейся на динамическом наблюдении, с подозрением на метастазы в легком.

Результаты. После трех проведенных курсов цитокинотерапии ранее отмечавшихся микроузлов по результатам ПЭТ-КТ не выявлено. Данных за свежие очаговые и инфильтративные изменения в легких тоже не зарегистрировано. Повышения температуры и других нежелательных явлений не наблюдалось.

Заключение. Ингаляционно вводимые лекарственные препараты цитокинов могут рассматриваться как инструмент целенаправленной и лучше переносимой комплексной превентивной противоопухолевой иммунотерапии у пациентов с подозрением на метастатические поражения органов дыхания.

Введение. Активирующие аутосомно-доминантные мутации в гене STAT1 - STAT1- GOF (gain-of-function) лежат в основе комбинированного иммунодефицита, основными проявлениями которого являются хронический кожно-слизистый кандидоз и аутоиммунные расстройства. В основе патогенеза данного заболевания лежит усиление функции белка STAT1, связанное с гиперфосфорилированием и задержкой дефосфорилирования. Результатом данного патологического процесса является критичное снижение уровня Тh17-лимфоцитов вследствие нарушения цитокиновой регуляции их созревания. Кроме того, в гене STAT1 описаны аутосомно-доминантные и аутосомно-рецессивные варианты, приводящие к потере функции этого белка (loss-of-function, LOF). Высокопроизводительное секвенирование облегчает поиск новых вариантов гена, однако их биологическая значимость не всегда очевидна и требует подтверждения иммунологическими исследованиями.

Цель настоящей работы - разработка и валидация экспресс-метода оценки фосфорилирования белка STAT1.

Материал и методы. В исследование были включены 17 пациентов с подтвержденными патогенными вариантами в гене STAT1 (STAT1-GOF n = 16 и STAT1-LOF n = 1), 7 пациентов с вариантами неясного клинического значения в гене STAT1, а также когорта здоровых индивидуумов (n = 50). После выделения мононуклеарной фракции из периферической крови проводили стимуляцию клеток с последующей оценкой фосфорилирования белка STAT1 методом проточной цитометрии.

Результаты. В результате сравнения когорты пациентов с патогенными вариантами STAT1-GOF с когортой здоровых индивидуумов были получены референсные значения фосфорилирования белка STAT1, относительно которых была выполнена оценка функции белка в когорте пациентов с вариантами неясного клинического значения.

Заключение. Методика показала высокую чувствительность и специфичность как в отношении STAT1-GOF-дефектов, так и в случаях редких LOF-вариантов.

Подлинность (идентичность) клеточных линий (клеток) является одним из важнейших показателей качества препаратов на основе жизнеспособных клеток человека. Иммунофенотипическая характеристика клеток человека имеет основополагающее значение для идентификации препаратов клеточной терапии перед клиническим применением. Проточная цитометрия - метод, наиболее широко используемый для фенотипирования клеточных линий. Исследование посвящено анализу особенностей валидации методик фенотипирования клеточных линий. В рамках данного исследования были рассмотрены ключевые параметры процесса валидации методики, а также актуальные данные об особенностях валидации, связанные с препаратами клеточной терапии, используемыми реактивами и оборудованием, редкими событиями и компенсацией.

В обзоре представлена информация о применении моноклональных антител (МкАт) в терапии опухолевых заболеваний. Рассмотрены механизмы действия этих препаратов, их виды, способы получения и основные подходы к применению при терапии опухолей. Приведены современные препараты МкАт, одобренные к применению и использующиеся для лечения гематологических и солидных злокачественных новообразований, отличающиеся направленностью действия за счет воздействия на конкретные молекулы, участвующие в механизмах канцерогенеза и роста опухолей.

Изложенные данные показывают, что синтез и производство МкАт, их конъюгация с лекарственными средствами или радионуклидами далеко продвинулись за последние десятилетия. Рассмотренные в статье методы иммунотерапии опухолей либо уже показали свою эффективность в терапии злокачественных новообразований, либо находятся на разных фазах клинических испытаний. Разработка современных, более совершенных технологий поможет решить имеющиеся проблемы и сделает лечение пациентов с онкологическими заболеваниями эффективнее и безопаснее.

Более 30 % жителей планеты страдают от аллергии. Единственным патогенетическим методом лечения аллергии, способным обеспечить долгосрочный эффект, считается аллерген-специфическая иммунотерапия (АСИТ). Этот метод предусматривает регулярное введение в организм пациента препаратов лечебных аллергенов или аллерговакцин с целью уменьшения выраженности клинических проявлений аллергии путем индукции иммунной толерантности к целевому аллергену. Однако у АСИТ есть и недостатки: низкое качество препаратов лечебных аллергенов и аллерговакцин на их основе, риск возникновения побочных эффектов, длительность курса лечения. За более чем столетний период использования АСИТ удалось добиться значительного прогресса в исследовании механизмов аллергии и развитии новых технологий иммунотерапии. Все большую популярность приобретают молекулярные подходы в создании аллерговакцин. Они позволяют повысить их безопасность, эффективность и стандартизировать процесс производства. В обзоре рассматриваются основные этапы развития АСИТ и различные технологии создания препаратов лечебных аллергенов и аллерговакцин. Особое внимание уделяется современным молекулярным методам иммунотерапии. Также обобщены актуальные представления о патогенезе аллергии и механизмах АСИТ.

Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) обладают сложными механизмами взаимодействия с иммунной системой, они способны модулировать врожденные и адаптивные иммунные реакции, а также усиливать ангиогенез. МСК производят разнообразные цитокины и хемокины, которые влияют на активность иммунокомпетентных клеток, воспаление и иммунную толерантность. Экзосомы, полученные из МСК, также влияют на иммунную регуляцию. Однако для полного использования терапевтического потенциала МСК необходимы дополнительные исследования и клинические испытания.